甲种胎儿蛋白诊断血清 : 甲种胎儿蛋白 (Alpha-fetoprotein,AFP)简称甲胎蛋白,是一种癌胚性蛋白。在人和哺乳类动物的胚胎血清中有相应种属的AFP,但于出生后不久,即逐渐消退至一般免疫学方法不易检测的程度,可是当患原发性肝癌时,血清中又复出现较高含量的AFP。甲胎蛋白诊断血清是用以检测人血清甲胎蛋白的诊断用品。
人AFP是一种分子量71,000左右的糖蛋白,其电泳迁移度介于白蛋白和α₁球蛋白之间,在个体发育过程中,AFP是由肝实质细胞和卵黄囊细胞合成。在动物实验中,用肝部分切除术或用药物诱发中毒性肝炎,在肝细胞再生时,伴有血清AFP浓度的上升; 当患原发性肝癌时,血清中出现AFP,用免疫酶技术研究AFP的超微结构定位,表明AFP合成位于肝癌细胞的粗糙内质网的核糖核蛋白体上。
制备纯化AFP的材料来源主要是胎儿血清或胎盘血清,用经过纯化的AFP抗血清和胎儿血清制备AFP抗原-抗体复合物,经过溶解、沉淀、洗涤加以纯化后,再用分子筛凝胶过滤,得到纯化的AFP制品。近年来,进一步用亲和层折技术,将纯化的AFP抗血清和正常人血清的丙种球蛋白分别联结到琼脂糖载体上,利用其免疫吸附的专一性来纯化AFP,用以上两种方法都可以获得免疫纯的AFP制品。
将纯化的AFP抗原充分乳化在Freund完全佐剂中,对马匹进行超免疫,得到马抗AFP单相抗血清,不需经过正常人血清吸收,与胎儿血清或肝癌病人血清作琼脂免疫电泳,在AFP的位置上有一条沉淀弧,此即为甲胎蛋白诊断血清。
在我国,甲胎蛋白诊断血清已广泛用于原发性肝癌的辅助诊断和人群普查,琼脂双向扩散法和对流电泳法是最常用的检测AFP的方法。这两种方法特异性高,简单方便,但灵敏度较低,分别可检出1～3μg/ml和0.3μg/ml的AFP。近年来,进一步发展了许多高灵敏度的AFP检测技术:如反向间接血凝试验,放射免疫自显影法和酶免疫分析法等,应用这些检测技术,测试AFL的灵敏度可提高到20ng/ml以下。在大规模自然人群中进行普查肝癌时,一般先用简便快速的反向间接血凝试验,发现阳性病例,再用放射免疫自显影法或酶免疫分析法作准确定量测定。通过普查可以早期发现原发性肝癌病例,以便早日治疗,延长患者生存率。因此,AFP普查对原发性肝癌具有早期诊断和提高远期疗效的价值。
引起AFP持续上升的疾病主要有:原发性肝癌,肝癌患者血清AFP持续存在,但其数值分布范围很广,可以大于20ng/ml到10⁶ng/ml,大部分原发性肝癌患者的AFP在300ng/ml以上,原发性肝癌患者AFP的阳性率在90%以上,因而有重要的诊断价值; 少数转移性肝癌和胃肠道癌,AFP阳性为数不多,数值也不高,但个别病人可高达10⁵ng/ml;畸胎瘤,AFP的出现与否取决于瘤组织的细胞来源,来源于卵黄囊细胞的畸胎瘤,AFP阳性;肝病,急性病毒性肝炎、慢性肝炎和肝炎后肝硬变,往往伴有AFP升高,大多数在300ng/ml以下,呈一过性升高。对肝病的AFP升高,应结合临床表现、其他实验室检查结果和随访观察同肝癌进行鉴别诊断。