诊断用单克隆抗体

2020-08-29 食功效-药物药理学 https://www.shigongxiao.com

  诊断用单克隆抗体 : 单克隆抗体(monoclonal Antibodies,McAb)是指由一个B细胞形成的细胞系,即其衍生的群落,所产生的抗体。由于每一个B细胞产生的抗体是由B细胞核内的DNA所决定的,因此假使这个B细胞系在遗传上没有发生突变,它及它的后代所产生的抗体是均一的、很纯的。
产生单克隆抗体有几种方法。一种是体外培养单个B细胞,在不断加入白细胞介素的条件下,使之形成B细胞系。另一种是用EB病毒感染单个B细胞使之恶化,形成瘤细胞系,同时产生McAb。最有效,也最常用的方法是用淋巴细胞杂交瘤技术,获得分泌McAb的杂交瘤细胞系。这种方法比较简单,获得McAb的量较大,注入小鼠腹腔中可以得到滴度很高的McAb,适于作为诊断试剂之用。
B细胞杂交瘤技术,是将一种缺次黄嘌呤转磷酸核糖基酶(HGPRT)的小鼠B细胞瘤培养成系,再用融合剂(聚乙二醇)把小鼠瘤细胞和免疫过的小鼠脾细胞 (B细胞)融合在一起,形成一个杂交瘤。具有瘤细胞生长迅速的特点,又有B细胞能分泌抗体的能力。因此,培养的杂交瘤就象一个小工厂,不断地产生McAb。如将杂交瘤放在液氮中,就可以长期保存。需要时,解冻复苏,再继续培养,仍可得到和过去相同的McAb。因此长期保存杂交瘤细胞,就可以在不同时间得到相同而均一的纯抗体。这有利于诊断用抗体的标准化,使不同实验室、不同年代所测定的结果可以互相比较,这是用抗原免疫动物所得的多克隆抗体所作不到的。
McAb的特点之一是专一性强。一个B细胞所产生的抗体只针对抗原上的一个抗原决定簇。由此B细胞所融合的杂交瘤所产生的McAb也只是针对该抗原决定簇,一般只有10几个氨基酸序列的多肽类或其他小分子结构,因此使用McAb作为诊断血清可以探测病毒、细菌、寄生虫或细胞的分子量很小的抗原。一个病毒、细菌、寄生虫或细胞具有几十个抗原决定簇。将上述生物注入动物后可以诱发几十种不同的抗体,称之为多克隆抗体,即取自动物的抗血清。这是许多单克隆抗体的混合物,对几十种抗原决定簇同时起反应。如二株病毒各有各的特异性抗原,也有共同抗原,用多克隆抗体诊断血清就会出现交叉现象,不能区分两株病毒。如使用甲株病毒特异的McAb就可以很容易把甲株病毒检出,因为该McAb只能与甲株特异性抗原起反应,从而避免了交叉反应。因此McAb诊断血清在分型或研究抗原组成方面有独到之处。
诊断用McAb已开始应用于临床和科研工作中。在内分泌研究方面,用McAb测定体内激素的含量,如绒毛膜促性腺激素(HCG)、黄体生成激素(LCG)、前列腺素、催乳激素等,国外均有诊断盒出售。在血液学方面,诊断T淋巴细胞亚群的McAb,国外已有几类商品供应,如OKT系统和Leu系统,可以快速区分人的T细胞中有多少辅助性T细胞、抑制性T细胞或细胞毒T细胞、未成熟T细胞等,对了解病人各类T细胞免疫功能的变化有很大帮助。最近又在研究诊断B细胞、巨噬细胞成多核白细胞及其亚群的McAb,已获得了一些有价值的McAb。估计不久,将有对血液内各种细胞成分及其亚群的McAb诊断盒出现。近年来,应用McAb对肿瘤抗原的探索作了许多工作,找到了一些抗肿瘤相关抗原的McAb。这些McAb虽然不是肿瘤的特异性抗体,但在诊断肿瘤或在肿瘤定位方面可能会起一定的作用。在传染病的诊断方面尤其是病毒性传染源的定型方面,McAb有时是唯一的诊断工具。如脊髓灰质炎有毒株或无毒株的鉴别,几种型或地区株的鉴别,登革热不同型的区分,肾病综合征的诊断等都可以用McAb加以诊断。在流行病学调查中,McAb诊断试剂盒将发挥更大的作用。

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