锡克试验毒素

2020-08-29 食功效-药物药理学 https://www.shigongxiao.com

  锡克试验毒素 : 锡克试验毒素是由白喉毒素稀释制成,用以测定人体对白喉的易感性。此法由Schick创始于1913年,故称为锡克试验。此试验可测定个体对白喉是否易感,不能测定个体中的白喉抗体单位,多用于监察人群对白喉的易感状态。
白喉毒素具有引起皮肤坏死的特异性作用。当皮内注射一个锡克试验剂量(0.1ml)的白喉毒素后,如体内没有足够的白喉循环抗体中和毒素,受试者注射部位出现红斑反应,严重者可出现轻度坏死。如体内有足够的白喉循环抗体,则白喉毒素被中和,注射部位无反应。此为阴性。
锡克试验阴性者血中白喉抗体约在0. 02IU/ml以上。一般认为白喉抗体在0.01IU/ml以上即可达到保护水平,所以锡克试验阴性者对白喉有免疫力,阳性者对白喉易感,无免疫力。锡克试验毒素中的其他异种性蛋白有可能引起过敏反应,将毒素加热破坏白喉毒素的毒性作为对照液,注射于另一臂皮内,根据反应情况区别过敏反应和毒素反应,以便正确判定反应结果。锡克试验方法简单易行,至今仍广泛用于监测人群抗白喉免疫状态。
锡克试验毒素和对照液制造 制造锡克毒素要用贮存两年以上稳定性较好的白喉毒素或精制白喉毒素。
用灭菌的稀释液将白喉毒素稀释至每0.1ml含一个试验剂量,加入适量的防腐剂,即制成锡克试验毒素。我国规程规定一个锡克试验剂量 (0.1ml) 含1/50最小致死量(MLD)白喉毒素。
将白喉毒素于80℃加热30~60分钟,破坏毒性,按照锡克试验毒素稀释即为对照液。
锡克试验毒素和对照液质量标准 为保证锡克试验毒素的毒性稳定性,应着重进行效力和稳定性试验。方法如下:
(1)最小致死量(MLD)试验: 将5ml锡克试验毒素注射于体重250g豚鼠皮内,每次试验注射4只以上豚鼠。72~96小时后应有75%以上的豚鼠死亡。
(2) 豚鼠皮内试验: 将待检锡克试验毒素稀释25倍及50倍,分别注射于豚鼠背部皮内0.1ml。注射48小时后,25倍稀释毒素注射部位有10mm左右的红斑反应,50倍稀释毒素注射部位无反应或仅有轻微发红。注射0.1ml不稀释的对照液部位应无反应。
(3)结合力试验: 一个锡克试验剂量与1/1250~1/1000IU标准白喉抗毒素混合,于空温放置30~60分钟,注射于家兔或豚鼠皮内,48小时后呈阳性反应。
(4) 最小反应量(MRD) 试验: 将待检锡克试验毒素按两倍稀释成一系列稀释液,分别注射于家兔背部皮内。48小时后应量8~10mm红斑反应。
(5)效力稳定性试验: 将待检锡克试验毒素于37℃放置24小时后,仍应符合效力试验的各项要求。
锡克试验毒素的应用 于前臂掌侧下约1/3处皮内注射0.1ml,一臂注射锡克试验毒素,另一臂注射对照液。注射后48、96小时各观察反应一次,判定结果。
(1) 阴性反应: 毒素和对照液注射部位均无反应或仅有微痕。表明机体对白喉有免疫力。
(2) 阳性反应: 对照液注射部位无反应。毒素注射部位有10mm以上的红色浸润,一般在注射24~48小时开始出现,至96小时左右达到高峰,随后逐渐消退,并留有褐色斑痕。或两侧注射部位数小时内出现发红反应,常伴有浸润,对照侧72小时后反应基本消退,试验侧直到7日反应才基本消退。表明机体对试验液及对照液中的异性蛋白有过敏反应,但仍属阳性,受试者无免疫力。表明机体对白喉敏感。
(3)假阳性反应: 两臂注射部位数小时内即呈发红反应,常伴有浸润,24~36小时最明显,第三日即消退。此反应是由其他异性蛋白引起的过敏反应。应属阴性反应,表明受试者有免疫力。

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